Edición dirigida del genoma en papa tetraploide a través de la expresión transitoria de TALEN por infección por Agrobacterium



La edición del genoma utilizando nucleasas específicas del sitio, como las nucleasas efectoras (TALEN) activadoras de la transcripción y la repetición palindrómica corta entrelazada regularmente agrupada, proteína 9 asociada a CRISPR (CRISPR-Cas9), es una tecnología poderosa para el mejoramiento de cultivos. , los reactivos de edición del genoma generalmente se expresan en células vegetales de transgenes integrados secos dentro del genoma. Esto requiere procesos de cruce para eliminar los nucleótidos extraños del genoma para generar segregantes nulos.

Sin embargo, en plantas altamente heterocigóticas como la papa, las líneas de progenie tienen agronómicas Rasgos de diferentes cultivares El Padre y no se convierten necesariamente Elite líneas. agrobacteriasPuede transferir genes exógenos en el ADN-T a las células vegetales. Esto se ha utilizado tanto para transformar plantas de manera estable como para expresar los genes de forma transitoria en las células vegetales. Aquí , infectamos la papa, con Agrobacterium tumefaciens que alberga el vector de expresión TALEN dirigido a la reductasa de la cadena lateral del esterol 2 ( SSR2 ) y brotes regenerados sin selección. Obtuvimos líneas regeneradas con el gen SSR2 interrumpido y sin el transgen del gen TALEN, revelando que su disrupción debería ser causada por la expresión transitoria del gen. La estrategia que utiliza la expresión transitoria del gen por Agrobacterium que llamamos mutagénesis agrobacteriana, desarrollada aquí, debería acelerar el uso de la tecnología de edición del genoma para modificar genomas heterocigotos de plantas.

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Publicado: 23 de julio de 2020

Fuente: Plant Biotechnology Journal

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