Edición del genoma libre de transgénicos en plantas de tomate y papa utilizando Agrobacterium: suministro mediado de un editor de base de citidina CRISPR/Cas9



Los científicos de plantas han adoptado rápidamente las herramientas de edición del genoma para el descubrimiento de la función de los genes y el mejoramiento de los cultivos. El desafío técnico actual es inducir de manera eficiente las mutaciones puntuales dirigidas precisas y predecibles, además de valiosas para fines de mejoramiento de cultivos. 

Los editores de base de citidina (CBE) son herramientas derivadas de CRISPR/Cas9 desarrolladas recientemente para dirigir una conversión de base de C a T. La integración genómica estable de los componentes CRISPR/Cas9 a través de la transformación mediada por Agrobacterium es el enfoque más utilizado en las plantas dicotiledóneas. Sin embargo, la eliminación de ADN extraño puede ser difícil de lograr, especialmente en plantas de propagación vegetativa. 

En este estudio, nos enfocamos en el gen de la acetolactato sintasa (ALS) en tomate y papa mediante un CBE con Transformación mediada por Agrobacterium. Hemos editado con éxito y eficiencia las bases de citidina dirigidas, lo que lleva a plantas resistentes al clorosulfurón con una eficiencia de edición de base precisa de hasta el 71 % en el tomate. Lo que es más importante, produjimos 12,9% y 10 % de plantas editadas pero sin transgénicos en la primera generación en tomate y papa, respectivamente. 

Se espera que este enfoque disminuya los efectos perjudiciales debido a la integración aleatoria del transgen (es) en el genoma del huésped. Nuestro enfoque exitoso abre nuevas perspectivas para la ingeniería genómica mediante la coedición de la ELA con otros genes, lo que lleva a plantas libres de transgén que albergan nuevos rasgos de interés.


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Publicado: 07 de marzo de 2019

Fuente: International Journal of Molecular Sciences

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